PEGuilação do peptídeo Lunatina-1 visando novo candidato à fármaco antimicrobiano / PEGylation of the peptide Lunatin-1 aiming at novel candidate for antimicrobial drug

As infecções relacionadas à assistência à saúde (IRAS) podem ser causadas por bactérias, vírus e fungos, sendo de extrema importância para o sistema de tratamento e pacientes. Com o alarmante avanço no surgimento de bactérias resistentes, tem havido uma preocupação crescente com as IRAS de origem bacteriana. Nesse sentido, várias pesquisas buscam alternativas para os fármacos antimicrobianos convencionais, sendo que os peptídeos antimicrobianos (AMPs), como a lunatina-1, aparecem como moléculas promissoras. No entanto, os AMPs geralmente apresentam rápida degradação proteolítica no trato gastrointestinal e meia-vida curta na corrente sanguínea, principais fatores limitantes para sua aplicação no tratamento de IRAS. Entre as estratégias empregadas para superar esses inconvenientes, a PEGuilação apresenta-se como alternativa eficaz que aumenta o tempo de circulação in vivo dos AMPs, resultando na melhora farmacocinética e, em alguns casos, também farmacodinâmica. A PEGuilação consiste na ligação covalente de cadeias de polietileno glicol (PEG) ao peptídeo, que pode ser efetuada por meio de uma reação aleatória ou sítio-específica. Neste trabalho, desenvolveu-se uma PEGuilação sítio-específica no N-terminal da lunatina-1 empregando-se mPEG-NHS de 2 kDa em tampão fosfato 100 mM, visando o aumento da solibilidade deste peptídeo, bem como para avaliar sua ação antimicrobiana. Com relação à reação de PEGuilação, avaliou-se a influência da razão molar PEG:peptídeo (10:1 ou 15:1) a pH 8,5. Foi obtido um rendimento de PEGuilação de 92%, através da análise por RP-HPLC quantitativo. Quanto à purificação da lunatina-1 PEGuilada, foi empregada a técnica semi-preparativa de RP-HPLC utilizando a coluna C18. A caracterização da lunatina-1 PEGuilada, incluindo determinação do grau de PEGuilação, foi realizada por MALDI-TOF Autoflex Speed (Bruker), mostrando que a molécula foi monoPEGuilada na região N-terminal. A atividade antimicrobiana de lunatina-1 livre e bioconjugada frente a diferentes cepas bacterianas, sendo duas Gram-negativas (ATCC 25922 de Escherichia coli e ATCC 9027 de Pseudomonas aeruginosa) e uma Gram-positiva (CECT 239 de Staphylococcus aureus), foi estudada por determinação da concentração inibitória mínima (CIM) em microplaca, sendo que foram obtidos valores de CIM de 86 e 140 µM para o peptídeo liver e PEGuilado, respetivamente. O potencial hemolítico também foi estudado, sendo que a forma PEGuilada mostrou significativa redução da atividade hemolítica em comparação à forma livre. Em suma, a PEGuilação da lunatina-1, aumenta a sua solubilidade e reduz a atividade hemolítica. Porém, para viabilizar esta estratégia a PEGuilação deve ser reversível, pois a conjugação ao polímero reduz atividade antimicrobiana

Health care-related infections (HAIs) caused by bacteria, viruses and fungi are extremely important for patients and health systems. With the alarming advance in the emergence of resistant bacteria, a growing concern with HAIs of bacterial origin is observed. In this sense, several studies investigate alternatives to conventional antimicrobial drugs and antimicrobial peptides (AMPs), such as lunatin-1, appear as promising molecules. However, AMPs generally show rapid proteolytic degradation in the gastrointestinal tract and short half-life in the bloodstream, the main limiting factors for their therapeutic application to treat HAIs. Among the strategies used to overcome these drawbacks, PEGylation presents itself as an effective alternative that increases the in vivo circulation time of AMPs, resulting in improved pharmacokinetics and, in some cases, also pharmacodynamics. PEGylation consists on the covalent attachment of polyethylene glycol (PEG) chains to the peptide, which can be carried out by means of a random or site-specific reaction. In this work, a site-specific PEGylation was developed at the N-terminus of lunatin-1 using 2 kDa mPEG-NHS to increase the solubility of this peptide, as well as to evaluate its antimicrobial activity. Regarding the PEGylation reaction, the influence of the molar ratio PEG: peptide (10: 1 or 15: 1) at pH 8.5 was evaluated and a PEGylation yield of 92% was obtained, based on quantitative RP-HPLC analysis. As for the purification of PEGylated lunatin-1, semi-preparative RP-HPLC was used. The characterization of PEGylated lunatin-1, including determination of the degree of PEGylation, was performed by MALDI-TOF Autoflex Speed (Bruker), showing that the peptide was monoPEGylated in the N-terminal region. The antimicrobial activity of free and bioconjugated lunatin-1 against different bacterial strains, two Gram-negative (ATCC 25922 from Escherichia coli and ATCC 9027 from Pseudomonas aeruginosa), and one Gram positive (CECT 239 from Staphylococcus aureus), was studied by determining the minimum inhibitory concentration (MIC) in a microplate, resulting in MIC values of 86 and 140 µM for the free and PEGylated peptide, respectively. The hemolytic potential was also studied and the PEGylated form showed a significant reduction in hemolytic activity compared to the free form. In short, the PEGylation of lunatin-1 increases its solubility and reduces hemolytic activity. However, to make this strategy feasible, PEGylation must be reversible, since the conjugation to the polymer reduces antimicrobial activity

Medication use by adults in greater Manaus: a population-based cross-sectional study, 2015

The use of medicines can be an indicator of healthcare access. Our aim was to evaluate the consumption of medicine and associated factors among adults in Manaus Metropolitan Region, located in the north of Brazil. A cross-sectional population-based study was conducted with adults, ≥18 years old, selected by probabilistic sampling. The outcome was the use of medicine in the previous 15 days. Poisson regression with robust variance was used to calculate the prevalence ratio (PR) of medicine consumption, with 95% confidence interval (CI). Use of medicines was reported by 29% (95% CI: 28-31%) of the participants. People with good (PR: 0.82, 95% CI: 0.72-0.94) and fair (PR: 0.77, 95% CI: 0.65-0.90) health status were shown to use less medication than those with very good health. People with partners (PR: 1.19, 95% CI: 1.08-1.31), and people who had sought healthcare service in the fortnight (PR: 2.16, 95% CI: 1.97-2.37) showed higher medicine consumption. Medical prescription (80.1%) was the main inductor of consumption; purchasing at a drug store (46.4%), and acquiring through the Brazilian Unified Health System (39.6%) were the main ways to obtain medicines. About one-third of adults in the Metropolitan Region of Manaus used medicines regularly, mainly people with very good health, living with partners, and with recent use of a health service.

Mortalidad por infecciones asociadas a la asistencia sanitaria. Hospital Abel Santa María Cuadrado, 2015 / Mortality due to Infections associated with healthcare. Abel Santa María Cuadrado Hospital, 2015

Objetivo: caracterizar la mortalidad por infecciones asociadas a la asisten-cia sanitaria (IAAS) en el Hospital Abel Santamaría Cuadrado de Pinar del Río durante el año 2015.Metodología: estudio descriptivo de corte transversal. La muestra estuvo constituida por 278 pacientes fallecidos por infecciones asociadas a la asistencia sanitaria con necropsia realizada y datos completos en la historia clínica. Resultados: el 40.6% de pacientes presentó una estadía hospitalaria de 22 días y más. El 66.2% presentó una infección de localización respiratoria, siendo la neumonía nosocomial la principal causa de muerte. El 28.8% de los organismos aislados fueron Enterobacter ssp. El antibiótico más utilizado fue la Ciprofloxacino, con un 54.3% y el procedimiento invasivo más prevalente fue el cateterismo vesical (84.2%). Conclusiones las principales variables asociadas a la mortalidad por IAAS fueron la sobrestadía hospitalaria y el uso de catéter urinario. La infección de localización respiratoria fue la más frecuente con predominio de gérmenes gram negativos. Se evidenció un elevado uso de antibióticos.

Where, when, and how the diagnosis of human visceral leishmaniasis is defined: answers from the Brazilian control program

BACKGROUND Timely diagnosis is recommended by the Brazilian Visceral Leishmaniasis (VL) Surveillance and Control Program to reduce case fatality. Attempts at assessing this topic in Brazil are scarce. OBJECTIVE This study aimed to describe where, when, and how the diagnosis of VL has been performed in a Brazilian endemic setting. METHODS Data of all autochthonous cases confirmed between 2011 and 2016 (N = 81) were recorded. The care-seeking itinerary until the confirmation of VL diagnosis was assessed among 57 patients. FINDINGS The majority of VL cases (79.1%) were reported by referral hospitals. The patients mainly sought primary health care centres at the onset of symptoms. However, they had to visit seven health services on average to achieve a confirmed diagnosis. The time from the onset of symptoms to the diagnosis of VL (TD) ranged from 1-212 (median, 25) days. The TD was longer among adult patients. There was a direct correlation between the patient's age and TD (r = 0.22; p = 0.047) and a higher occurrence of deaths due to the disease among older patients (p = 0.002). Almost all the patients (98.9%) underwent laboratory investigation, and the VL diagnosis was mainly confirmed based on clinical-laboratory criteria (92.6%). Positive results for the indirect fluorescence antibody test (22.7%) and parasitological examination plus rk39-based immunochromatographic tests (21.3%) were commonly employed. MAIN CONCLUSIONS VL diagnosis was predominantly conducted in hospitals with a long TD and wide application of serology. These findings may support measures focused on early diagnosis, including a greater involvement of the primary health care system.

Proteína C reativa: aplicações clínicas e propostas para utilização racional / C-reactive protein: clinical applications and proposals for a rational use

A proteína C reativa (PCR) é uma das proteínas de fase aguda cuja solicitação tem crescido de forma exponencial em vários países, incluindo o Brasil. Neste estudo, a utilidade da PCR em diversas situações clínicas foi revisada por um grupo de médicos composto por especialistas em Medicina Interna, Emergências Médicas, Terapia Intensiva, Rastreamento e Medicina Laboratorial com o objetivo de analisar a literatura pertinente e propor diretrizes para o uso mais racional desse exame laboratorial. O resultado foi a criação de fluxogramas orientadores da solicitação de PCR adaptados a quatro ambientes assistenciais diferentes, sendo eles unidades de terapia intensiva, pronto-socorro, enfermarias e ambulatórios. Esses fluxogramas e uma discussão mais detalhada sobre as diversas indicações clínicas do exame são apresentados neste estudo.

C-reactive protein (CRP) is an acute-phase protein whose requests have been growing exponentially in several countries, including Brazil. In this study, the use of CRP in several clinical situations was reviewed by a group of physicians comprised by specialists in internal medicine, medical emergencies, intensive care, screening, and laboratory medicine, aiming to analyze the applicable literature and to propose guidelines for a more rational use of this laboratory test. The result was the creation of flowcharts guiding CRP request, adjusted to four different healthcare environments, namely, intensive care units, emergency room, wards, and outpatient clinics. These flowcharts, as well as a more detailed discussion on several clinical recommendations for the test, are presented in this study.

Use of an indicator to evaluate physician adherence to prescription guidelines for the treatment of heart failure

The aim of this study was to use indicators to evaluate physician adherence to prescription guidelines for heart failure treatment in a university hospital. This was a prospective cohort study conducted in a university hospital. The information collected at the time of patient admission, including therapeutic indication, absolute contra indications and intolerance, was utilised for the formulation of a guideline adherence indicator (GAI). This indicator was calculated as follows: (the number of patients who used the medication/the number of eligible patients) x 100. The percentage of eligible patients was calculated using the following formula: (the number of eligible patients/the total number patients) x 100. The GAI was applied to a population of 53 patients. Inhibitors of angiotensin-converting enzyme/angiotensin receptor blocker (ACE-I/ARB) combination therapy were used in the greatest percentage of eligible patients (92.4%) and demonstrated the largest GAI value (73.5%). The percentages of patients who were eligible for beta-blockers, spironolactone and digitalis treatments were 81.1%, 52.8% and 60.4%, respectively. The GAI values for the use of beta-blockers, spironolactone and digitalis were 60.4%, 57.1% and 56.2%, respectively. For the studied patient population, the GAI was consistent with the proportion of patients who were eligible to receive digitalis and spironolactone.

O objetivo deste estudo foi utilizar indicadores para avaliar a adesão de médicos às diretrizes para tratamento da Insuficiência Cardíaca em um hospital universitário. Estudo de coorte prospectivo, conduzido em um hospital universitário. As variáveis coletadas na admissão do paciente foram: indicação terapêutica, contraindicações absolutas e intolerância, sendo utilizadas para elaboração de um indicador de adesão à diretriz (IAD). Este indicador foi calculado através da relação: (número de pacientes que utilizaram o medicamento/número de pacientes elegíveis) x 100. A % de pacientes elegíveis foi calculada da seguinte forma: (número de pacientes elegíveis/número total de pacientes) x 100. Os IAD foram aplicados para uma população de 53 pacientes. Os Inibidores da Enzima Conversora de Angiotensina/Bloqueadores dos Receptores de Angiotensina foram as classes farmacológicas que apresentaram maior % de pacientes elegíveis (92,4%) e apresentaram o melhor IAD (73,5%). A % de pacientes elegíveis para beta-bloqueadores, espironolactona e digitálicos foi de 81,1%, 52,8% e 60,4%, respectivamente. O IAD para beta-bloqueadores foi 60,4%, espironolactona 57,1% e digitálicos 56,2%. Na população estudada, o IAD foi compatível com a proporção de pacientes elegíveis para digitálicos e espironolactona.

Classificação das modalidades de atendimento em centros de atenção psicossocial (CAPS) / Classification of the modalities of care in community mental health service (CAPS)

Objetivo: Classificar as modalidades de atendimento nos Centros de Atenção Psicossocial (CAPS) de acordo com seus graus de especialização. Método: Análise das modalidades de atendimento nos cinco CAPS da cidade de Santos através da Classificação Internacional dos Cuidados em Saúde Mental, da Organização Mundial da Saúde (WHO-ICMHC). Resultados: Em uma escala de especialização, que vai de O a 3, os CAPS obtiveram valores entre I e 3 na maior parte das 10 modalidades avaliadas. A exceção foi em duas modalidades, que se apresentaram ausentes (valor O). Conclusões: Foi possível classificar estes serviços através do WHO-ICMHC. Por este indicador, muitas das modalidades apresentam grau baixo de especialização. Ele se mostrou compatível com a realidade destes serviços e de fácil aplicação. Mostra-se útil para pesquisar e monitorar este tipo de atendimento.

Evaluación de Actividades de Salud Comunitaria Durante el Período Diciembre 1999 a Septiembre 2001 Federación Red NicaSal / Evaluation of activities of community health during the period December 1999 to September 2001 Federacion Nicasalud Net

Este documento presenta los resultados de la evaluación final realizada en septiembre del 2001 y los compara con estudios de línea de base realizados en diciembre de 1999 por la OPVs y en agosto del 2000 por las ONGs. La metodología utilizada para la evaluación fue la misma que se usó para los estudios de líneade base: Lot Quality Assurance Sampling LQAS. NicaSalud coodinó una capacitación de refrescamiento y entandarización de los cuestionarios para la recolección de datos. El área geaográfica de cada proyecto fue dividada en Áreas de Supervisión y se recopiló una muestra aleatoria sistemática de l9 observaciones en cada una de Supervisión para cada grupo poblacional definido por cada organización: Madres con niños/niñas o-11 meses, madres con niñas/niños 12-23 meses, mujeres 15 a 49 años no embarazadas, hombres 15 a 49 años, adolescentes y jóvenes de 15 a 24 años. Los datos obtenidos fueron procesados en programa EPIINFO. La Red NicaSalud inició como un proyecto que combinó los esfuerzos de un grupo de organizaciones nacionales e internacionales presentes en el país, para restaurar y proteger la salud de la población afectada por el Huracán Mitch, de acuerdo a los lineamientos y objetivos de USAID

A clínica, a epidemiologia e os outros saberes em saúde: pensando os modelos assistenciais / The clinical, the epidemiology and others knowledges in health: to think the assistence models

Este artigo discute as propostas reformadoras de modelo tecno-assistencial defendidas por Campos frente à programaçäo em saúde, quanto à incorporaçäo das necessidades sentidas da populaçäo ao planejamento e gestäo dos serviços de saúde; questionando-as por näo avançarem sobre os limites impostos pelo monopólio médico-científico das açöes de saúde no setor público; e sustentando a necessidade de se revalorizar e estudar o universo dos saberes e práticas em saúde näo científicos, muito diversificados e desconhecidos quanto ao seu potencial de contribuiçöes à Saúde Pública